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Copan WASP全自动微生物前处理系统性能及其临
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摘要：0 引言 随着电子科技和通信技术的进步以及成像技术在医学领域的应用[1-2]，临床微生物检验自动化得到蓬勃的发展，微生物检验传统的手工接种方式发生了质的飞跃，为微生物检验发
0 引言
随着电子科技和通信技术的进步以及成像技术在医学领域的应用[1-2]，临床微生物检验自动化得到蓬勃的发展，微生物检验传统的手工接种方式发生了质的飞跃，为微生物检验发展创造了有利条件[3]。全自动微生物前处理系统在临床中的应用既降低了差错率，保证了生物安全，又提供了样本接种流程标准化的操作平台，降低了微生物检验人员的工作强度，使其摆脱重复、烦琐的操作，精于检验后流程的质量控制，确保结果数据的准确性及其可靠性[4-6]。当前，国内外研发了一批全自动微生物前处理系统，如意大利Copan公司的WASP、法国bioMerieux公司的PREVI?Isola、美国BD公司的Innova以及中国武汉迪艾斯科技有限公司的Diascie ProBact等[7-8]，为临床微生物检验自动化奠定了坚实的基础[9]。我科于2014年在国内率先引进了Copan WASP全自动微生物前处理系统，经对系统参数的探讨、分析，设置优化样本处理方案，联接实验室信息系统（laboratory information system，LIS），利用条码识别对临床样本自动化接种，大大地提高了工作效率。然而，在临床应用中，如何正确使用仪器，以及如何应对ISO 对仪器性能评估的要求[10]，目前报道较少。本文就我科使用的Copan WASP全自动微生物前处理系统的主要仪器的工作性能进行评估，并对临床样本分离培养效果与手工法（Manual）进行比较，探讨其在临床中的应用价值。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 样本来源
痰和中段尿标本各50份均采集自我院各病区。化脓链球菌ATCC、铜绿假单胞菌ATCC、金黄色葡萄球菌ATCC和大肠埃希菌ATCC 标准菌株购自卫生健康委员会临床检验中心。
1.1.2 仪器设备
Copan WASP全自动微生物前处理系统由意大利Copan公司生产，微生物鉴定分析系统Vitek-MS购自法国bioMerieux公司。
1.1.3 试剂耗材
痰消化剂Sputasol购自英国Oxoid公司，Copan12无菌痰管及挑痰棒购自意大利Copan公司，Vitek-MS基质液及靶板购自法国bio-Merieux公司，血琼脂平板、含万古霉素巧克力平板和麦康凯平板购自郑州安图生物工程有限公司。
1.2 方法
1.2.1 混合菌悬液配制
将化脓链球菌ATCC、铜绿假单胞菌ATCC、金黄色葡萄球菌ATCC、大肠埃希菌ATCC 4种标准菌株用无菌生理盐水配置为0.5标准麦氏浊度单菌悬液（1.5×108cfu/ml），并分别稀释成 1.0×107、1.0×106、1.0×105、1.0×104和 1.0×103cfu/ml系列单菌悬液，再按 1∶1、1∶1∶1 或 1∶1∶1∶1比例将单菌悬液配制为含2、3、4种菌株的不同浓度的混合菌悬液共16份，以评估前处理系统的性能。混合菌悬液配制方案见表1。
表1 混合菌悬液配制方案cfu/ml混合菌悬液 菌株 化脓链球菌 铜绿假单胞菌 金黄色葡 大肠埃希菌编号 数量 萄球菌1 2 1.0×105 1.0×105 2 2 1.0×103 1.0×105 3 2 1.0×107 1.0×105 4 2 1.0×104 1.0×107 5 3 1.0×105 1.0×105 1.0×105 6 3 1.0×103 1.0×105 1.0×105 7 3 1.0×105 1.0×103 1.0×107 8 3 1.0×107 1.0×105 1.0×103 9 3 1.0×104 1.0×105 1.0×106 10 3 1.0×106 1.0×104 1.0×105 11 3 1.0×105 1.0×106 1.0×105 12 4 1.0×105 1.0×105 1.0×105 1.0×105 13 4 1.0×107 1.0×106 1.0×105 1.0×104 14 4 1.0×106 1.0×107 1.0×104 1.0×105 15 4 1.0×105 1.0×104 1.0×106 1.0×107 16 4 1.0×104 1.0×105 1.0×105 1.0×106
1.2.2 样本处理、接种与培养
1.2.2.1 样本处理
使用挑痰棒挑取痰标本可疑部分，置于含1 ml痰消化剂的Copan12无菌痰管中，35～37℃孵育90 min，使痰液均质化，制成痰标本悬液；中段尿标本则倒入特定的无菌尿杯中，粘贴条码备用。
1.2.2.2 样本接种
仪器接种：痰标本采用4 Quadrants type 1模式四区划线；尿标本采用Single streak type 2模式连续划线；混合菌悬液采用4 Quadrants type 1模式四区划线。
手工接种：由同一位具有丰富工作经验、操作熟练的检验人员严格按照《全国临床检验操作规程》（第4版）接种步骤操作[11]。痰标本悬液使用无菌棉签蘸取并涂布于平板的第一区，再以接种环进行四区划线。痰标本接种于血琼脂平板、含万古霉素巧克力平板和麦康凯平板，尿液标本接种于血琼脂平板和麦康凯平板，混合菌悬液接种于单一的血琼脂平板，一式3份，且均使用1 μl接种环。
1.2.2.3 细菌培养
Copan WASP全自动微生物前处理系统由WASP接种划线模块和WASPLab孵育及镜像系统模块组成，两者通过轨道连接，经WASP接种划线模块接种完毕的平板直接运送入WASPLab孵育及镜像系统模块中进行培养、拍照。系统参数设置：痰标本和混合菌悬液的孵育环境为35℃、含5%CO2的二氧化碳孵箱，中段尿标本的孵育环境为35℃普通孵箱。手工法的培养环境同仪器法。
文章来源：《自动化应用》 网址: http://www.zdhyyzz.cn/qikandaodu/2020/0727/456.html
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